Описание
В качестве расширения возможностей системы можно рассматривать комплекс LSM 880 NLO (Non Linear Optic). Это сочетание LSM 880 с короткоимпульсным фемтосекундным инфракрасным лазером с перестраиваемым диапазоном (680 – 1080нм) для мультифотонного возбуждения флуоресценции. Мультифотонный процесс возбуждения красителя (одновременное поглощение нескольких низкоэнергетических инфракрасных фотонов) базируется на эффектах нелинейной оптики и выражается в эмиссии в более коротковолновой области, нежели возбуждение.
Ключевые преимущества мультифотонной микроскопии:
- Более высокая, в 6-7 раз, чувствительность системы, т.к. в этом случае (возбуждение флуорофора возможно только внутри фокального микрообъема, менее 0,1 мкм3) флуоресценция, не требуя конфокальной точечной диафрагмы, выводится напрямую на внешние более высокочувствительные NDD-детекторы (наращивание до 5-10 шт., в зависимости от базового штатива);
- Большая, до 500 мкм, глубина пенетрации в живые органы и ткани, возможность работать с целыми физиологическими объектами, в силу слабого светорассеивания инфракрасного излучения;
- Неповреждающий длительный, до нескольких часов, мониторинг объектов, в силу низкой цитотоксичности инфракрасного излучения и снижения клеточного повреждения фотоиндуцированными процессами;
- Прецизионное Z-локализованное отбеливание (FRAP-технология) объекта для снятия транспортных кинетических характеристик молекул в компартментах клеток, в силу отсутствия возбуждения и отбеливания флуорохромов вне фокального микрообъема.
Вышеперечисленные особенности LSM 880 NLO являются уникальным и незаменимым инструментом для научных исследований сложных физиологических процессов в живых микробиологических объектах.
Технология